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示踪细胞系

HIV Rev-依赖型示踪细胞系

HIV Rev-依赖型示踪细胞系

HIV Rev-依赖型示踪细胞来源于CD4 T 细胞,表达天然水平的HIV受体。利用HIV Rev和RRE ( Rev -应答元件)之间的相互作用来调节示踪基因表达,从而克服了LTR报告基因的缺陷。通过GFP、Luc或GFP / Luc标记,我们的Rev依赖型细胞为HIV研究提供了一个通用灵活的平台。Rev仅存在于HIV+细胞中,Rev的高特异性显著降低了背景信号强度,增加了检测的灵敏度。其应用非常广泛,包括大量筛选中和抗体和抗HIV药物,以及研究HIV细胞-细胞传递、宿主限制及依赖性因素。

详细介绍

HIV Rev-依赖型示踪细胞系

新一代HIV示踪细胞

      HIV Rev-依赖型示踪细胞利用HIV RevRRE ( Rev -应答元件)之间的相互作用来调节示踪基因表达,从而克服了LTR报告基因的缺陷。Rev仅存在于HIV+细胞中,Rev的高特异性显著降低了背景信号强度,增加了检测的灵敏度。因此,Rev依赖型示踪细胞能特异性检测低水平的HIV复制,克服LTR启动子产生的假信号。
     Rev-依赖型示踪细胞来源于CD4 T细胞,表达天然水平的HIV受体,是对X4、R5野生型HIV分离株和某些SIV菌株具有广泛敏感性的天然HIV靶标。通过GFP、LucGFP / Luc标记,我们的Rev-依赖型细胞为HIV研究提供了一个通用灵活的平台。Rev-依赖型示踪细胞应用非常广泛,包括大量筛选中和抗体和抗HIV药物,以及研究HIV细胞-细胞传递、宿主限制及依赖性因素。


产品优势:
  • 高度的敏感性和特异性: Rev调控的示踪表达
  • 双功能: GFP和荧光素酶双报告系统
  • 天然HIV靶点 : 来源于人类CD4 T细胞
  • 生理相关性 : 天然水平的HIV受体 / 共受体
  • 广泛易感性 : 对X4、R5原发性HIV分离株、一些SIV敏感
高度的HIV敏感性和特异性
Rev依赖型示踪细胞系具有高度的特异性和敏感性, 标识物有GFP、荧光素酶或GFP /荧光素酶组合选项,可提供卓越的实用性和灵活性,消除假阳性的信号。  

最小的背景信号
Rev依赖型示踪细胞被设计成利用HIV RevRRE ( Rev -应答元件)之间的相互作用来调节示踪基因表达,从而克服了LTR报告基因的缺陷。Rev仅存在于HIV+细胞中,Rev的高特异性显著降低了背景信号,增加了灵敏度。
   
 
深度表征
对抗HIV抑制剂、HIV激活剂和HIV中和抗体具有高度反应性和敏感性,我们的每一株细胞系都已经进行了彻底的表征和验证。我们的示踪细胞来源于人类T细胞,携带生理或接近生理水平的HIV受体和相关T细胞受体。因此,我们的示踪细胞系特别适用于量化实验室和临床研究样本HIV分离物和bnABs

极大的生理相关性
Rev-依赖型示踪细胞来源于CD4 T细胞, 如CEM - SS (Wu et al., 2007)和A3R5 (McLinden et al., 2013),并进一步设计了LTRRev依赖的双报告系统。因为它们来源于CD4 T细胞,不含有过多的HIV受体,所以我们的示踪细胞提供了生理相关和bnAB敏感的示踪系统。


A3R5细胞受体细胞密度。资料来源: PLOS ONE, McLinden et al. 2013, 8: 11, e7756。我们的Rev依赖型细胞系(来源于CEM - SS和A3.01细胞)没有过多的受体,更接近天然T细胞HIV受体密度。
 
 





使用方便
一次感染,三次读解。应用我们的Rev-依赖型示踪细胞系统,一次感染可能产生三个解读结果,达到精简流程提高筛选效率。基于荧光素酶信号可快速地筛选出阳性候选物,基于GFP的荧光信号可通过流式细胞仪获得群体动态。

应用:
我们的Rev依赖型示踪细胞系可以应用于以下方面:

  • TCID50检测 : 常规HIV传染性和定量
  • 通过一步感染法进行抗HIV药物筛选
  • 抗HIV化合物EC50/LD50的常规定量
  • 高通量中和抗体筛查( bnAB ) (来自实验室和临床研究样本)
  • 中和抗体定量
  • HIV细胞间传播与耐药性研究
  • HIV宿主限制因子( HRF )研究
  • HIV宿主依赖性因子( HDF )研究
  • 低水平HIV基因表达评估
  • HIV整合前转录研究
  • HIV潜伏期和再激活研究
  • 重新激活后检测HIV生长
  • HIV嗜性测定
应用实例:
1.HIV中和抗体定量

 




  感染前,HIV ( AD8 ),一种R5病毒与或不与HIV中和抗
  体B12 ( 10μg·ml - 1 final )一起孵育。1h后,
Rev-
 A3R5-GFP
细胞被Ab中和病毒和未中和病毒感染。洗涤
 细胞并培养48小时。流式定量表达GFP。

 
 
 






2. Rev-依赖型GFP / Luc示踪细胞一步法抗HIV药物筛选:


参考文献
Wu Y, Beddall MH, Marsh JW. Rev-dependent indicator T cell line. Current HIV Research. 2007; 5:395-403.
Yoder A, Yu D, Dong L, Iyer SR, Xu X, Kelly J, et al. HIV envelope-CXCR4 signaling activates cofilin to overcome cortical actin restriction in resting CD4 T cells. Cell. 2008; 134(5):782-92. PubMed PMID: 18775311.
Guo J, Wang W, Yu D, Wu Y. Spinoculation triggers dynamic actin and cofilin activity facilitating HIV-1 infection of transformed and resting CD4 T cells. J Virol. 2011; 85(19):9824-33. PubMed PMID: 21795326.

 

HIV Rev-依赖型示踪细胞系产品目录

Cat No. 产品 产品描述 规格 价格
C0011 Rev-A3R5-GFP 来源于 A3.01 细胞. 天然的表达 CD4, CXCR4, 和 α4β7;组成型的 CCR5表达; Rev-依赖型 GFP 表达。 5 X 106 cells/vial ¥15,990
C0012 Rev-A3R5-GFP/Luc 来源于 A3.01 细胞. 天然的表达 CD4, CXCR4, 和 α4β7;组成型的 CCR5表达; Rev-依赖型GFP和Luc 表达。 5X 106 cells/vial ¥18,990
C0022 Rev-A3-GFP/Luc 来源于 A3.01 细胞. 天然的表达 CD4, CXCR4,和 α4β7 ; Rev-依赖型GFP和Luc 表达。 5X 106 cells/vial ¥15,990
C0031 Rev-CEM-GFP 来源于 CEM-SS 细胞. 天然的表达 CD4, CXCR4; Rev-依赖型GFP 表达。 5 X 106 cells/vial ¥8,990
C0032 Rev-CEM-GFP/Luc 来源于 CEM-SS 细胞. 天然的表达 CD4, CXCR4; Rev-依赖型GFP和Luc 表达。 5 X 106 cells/vial ¥11,990
C0033 Rev-CEM-Luc 来源于 CEM-SS 细胞. 天然的表达 CD4, CXCR4; Rev-依赖型Luc表达。 5X 106 cells/vial ¥8,990























HIV Rev-依赖型示踪细胞仅获得有限使用 HIV Rev-依赖型示踪细胞供研究使用,不用于断或治目的或用于人体或动物。
 





 

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